pda培养基如何配置_PDA培养基的配制方法 环球观点

1、PDA培养基的配方土豆 200g葡【pú】萄【táo】糖 20g琼脂 15～20g水 1000mLpH值 自然PDA培养基【jī】的【de】配【pèi】制称量和熬【áo】煮 按培养【yǎng】基配方逐一称【chēng】取去皮【pí】土豆。

2、土豆【dòu】切【qiē】成小块放入锅【guō】中，加【jiā】水【shuǐ】1000ml，在【zài】加热器上【shàng】加热至沸腾，维持20-30min，用可【kě】用2层纱布趁热在量杯上过滤，滤【lǜ】渣弃取。

3、滤液补充水分到1000ml。

(资料图)

4、加热溶解 把滤液放【fàng】入锅【guō】中【zhōng】，加入葡萄糖【táng】20g，琼脂15～20g(提前搞碎)，然后【hòu】放【fàng】在石棉网上，小【xiǎo】火加【jiā】热，并用玻棒【bàng】不断搅拌【bàn】，以防琼脂糊底或溢出，待琼脂完全溶【róng】解后，再补充【chōng】水分至所需量。

5、分装 按实训【xùn】要【yào】求，将配制的培【péi】养基分装入试管【guǎn】或500ml三角瓶内。

6、分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。

7、分装量【liàng】：固体培养基约【yuē】为试【shì】管高【gāo】度的1/5，灭菌后制【zhì】成斜面，分装入三角瓶【píng】内以不超过其容积【jī】的一半为【wéi】宜;半固体培养基以试【shì】管高度的1/3为宜【yí】，灭菌后垂直待凝。

8、加棉塞 培养基分【fèn】装完毕后【hòu】，在【zài】试管口或三角烧瓶【píng】口上塞上棉塞【sāi】(或泡沫【mò】塑料【liào】塞或试管帽等)，以阻止外界微生物【wù】进入培养基内造成污【wū】染【rǎn】，并【bìng】保【bǎo】证有良好的通气【qì】性能。

9、包【bāo】扎 加塞后【hòu】，将全【quán】部试管【guǎn】用麻绳或【huò】橡皮筋捆好，再【zài】在棉塞【sāi】外包【bāo】一层牛皮纸，以防止灭菌时冷凝水润湿棉【mián】塞，其外再用一道线绳或橡皮筋扎【zhā】好，用记号笔【bǐ】注明培养基名称、组别【bié】、配制日期【qī】。

10、棉塞制作说明棉塞【sāi】的作用【yòng】：一是防止杂菌污【wū】染;二是【shì】可过滤空气，保证通气良【liáng】好【hǎo】，并可减缓【huǎn】培养基水【shuǐ】分的蒸发【fā】，所以【yǐ】正【zhèng】确地制备棉塞是【shì】培养基制备中重要的一环。

11、正【zhèng】确【què】的棉塞是形状、大小，松【sōng】紧应【yīng】与试管【guǎn】口(或三角烧瓶)完全【quán】适合。

12、过【guò】紧【jǐn】则妨碍空气流通，操作【zuò】不便;过松时【shí】，空【kōng】气会毫无障【zhàng】碍地进入试管(或三【sān】角烧瓶)中，达【dá】不到灭菌的目【mù】的。

13、棉塞过【guò】小往往易【yì】掉进试【shì】管内，因此棉塞【sāi】质量的优劣对实【shí】训的【de】结果有很大的影响。

14、正【zhèng】确的棉塞头较大【dà】，加塞时【shí】，应【yīng】使棉塞【sāi】长度【dù】的1/3留在试管口外，2/3在试管口内。

15、目前【qián】，有条件的实训室已使用坚【jiān】固的【de】塑料试管帽、金属试管帽、硅【guī】胶泡沫塞替代棉【mián】塞，制作【zuò】棉塞要【yào】选纤维【wéi】较【jiào】长【zhǎng】的【de】棉花，一般不选用脱脂棉。

16、因为它容易吸水变湿，造成污染，而且价格也贵。

17、PDA培养基配制注意【yì】事项培【péi】养基经【jīng】灭【miè】菌后，必须放在37C温箱培养24h，无菌生长者方【fāng】可【kě】使用。

18、PDA培养基一般不需要调pH。

19、对于要调节pH的培养基，一般用pH试纸测定其pH。

20、如果培养基偏酸或偏碱时，可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液进行【háng】调【diào】节【jiē】。

21、调【diào】节时应逐滴【dī】加入NaOH或HCl溶液，防止局部过酸【suān】或过【guò】碱破坏培【péi】养【yǎng】基成分。

22、培养基在使用时也可以做【zuò】成不【bú】含琼脂的【de】液体培养基，用于菌类【lèi】的震荡【dàng】培养。

23、培养【yǎng】基也【yě】可以加入氯霉素或土霉【méi】素，加入【rù】量为0.2g/L培养基，主要是【shì】为了抑【yì】制【zhì】细菌的生长，减少干扰【rǎo】性。

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